RNAclean Kit

A-1 Sejtlízis vagy homogenizálás nem elegendő

---- Csökkentse a mintahasználatot, növelje a lízispuffer mennyiségét, növelje a homogenizációt és a lízis idejét.

A-2 A minta mennyisége túl nagy

---- Csökkentse a felhasznált minta mennyiségét vagy növelje a lízispuffer mennyiségét.

A-1 Elégtelen sejtlízis vagy homogenizáció

---- Csökkentse a mintahasználatot, növelje a lízispuffer mennyiségét, növelje a homogenizációt és a lízis idejét.

A-2 A minta mennyisége túl nagy

---- Kérjük, vegye figyelembe a maximális feldolgozási kapacitást.

Az A-3 RNS nem eluálódik ki teljesen az oszlopból

---- RNáz-mentes víz hozzáadása után hagyja néhány percig a centrifugálás előtt.

A-4 Etanol az eluálószerben

---- Öblítés után centrifugálja újra, és távolítsa el a mosópuffert, amennyire csak lehetséges.

A-5 A sejttenyésztő tápközeget nem távolítják el teljesen

---- A sejtek összegyűjtésekor feltétlenül távolítsa el a tenyésztő tápközeget, amennyire csak lehetséges.

A-6 Az RNSstore-ban tárolt sejteket nem centrifugálják hatékonyan

---- az RNSstore sűrűsége nagyobb, mint az átlagos sejttenyésztő táptalaj; tehát növelni kell a centrifugális erőt. Javasoljuk, hogy 3000x g -vel centrifugálja.

A-7 Alacsony RNS-tartalom és bőség a mintában

---- Pozitív minta segítségével határozza meg, hogy az alacsony hozamot a minta okozza-e.

A-1 Az anyag nem friss

---- A friss szöveteket azonnal folyékony nitrogénben kell tárolni, vagy azonnal az RNSstore reagensbe kell helyezni az extraháló hatás biztosítása érdekében.

A-2 A minta mennyisége túl nagy

---- Csökkentse a minta mennyiségét.

A-3 RNáz szennyeződésn

---- Bár a készletben található puffer nem tartalmaz RNázt, az RNáz könnyen szennyeződik az extrakciós folyamat során, és óvatosan kell kezelni.

A-4 Elektroforézis szennyezés

---- Cserélje ki az elektroforézis puffert, és győződjön meg arról, hogy a fogyóeszközök és a betöltő puffer mentesek az RNáz szennyeződéstől.

A-5 Túl nagy terhelés az elektroforézishez

---- Csökkentse a minta betöltésének mennyiségét, az egyes lyukak terhelése nem haladhatja meg a 2 μg-ot.

A-1 A minta mennyisége túl nagy

---- Csökkentse a minta mennyiségét.

A-2 Néhány minta magas DNS-tartalommal rendelkezik, és DNáz-val kezelhető.

---- Végezzen RNázmentes DNáz kezelést a kapott RNS oldattal, és az RNS közvetlenül felhasználható a további kísérletekhez a kezelés után, vagy tovább tisztítható RNS tisztító készletekkel.

Üvegárukhoz, 150 ° C -on 4 órán keresztül sütve. A műanyag edények esetében 0,5 M NaOH-ban 10 percre merítjük, majd alaposan leöblítjük RNázmentes vízzel, majd sterilizáljuk az RNáz teljes eltávolítása érdekében. A kísérletben használt reagenseknek vagy oldatoknak, különösen víznek, mentesnek kell lenniük RNáz -tól. Minden reagenskészítményhez használjon RNázmentes vizet (adjon vizet egy tiszta üvegpalackhoz, adjon hozzá DEPC-t 0,1% (V/V) végkoncentrációhoz, rázza fel éjszakán át és autoklávozza).