Mágneses vérfoltok DNS készlet

A-1 Alacsony sejt- vagy víruskoncentráció a kiindulási mintában-gazdagítsa a sejtek vagy vírusok koncentrációját.

A-2 A minták elégtelen lízise-A mintákat nem keverték össze alaposan a lízispufferrel. Javasoljuk, hogy alaposan keverje össze impulzus-örvényléssel 1-2 alkalommal. - Nem elegendő sejtlízis, amelyet a proteináz K aktivitásának csökkenése okoz. Javasoljuk, hogy vágja a szövetet apró darabokra, és hosszabbítsa meg a fürdési időt, hogy eltávolítsa az összes maradékot a lizátumból.

A-3 Elégtelen DNS-adszorpció. -A lizátumnak a centrifugálási oszlopba történő átvitele előtt nem adtak hozzá etanolt vagy alacsony százalékos arányt 100% -os etanol helyett.

A-4 Az elúciós puffer pH-értéke túl alacsony. -Állítsa be a pH-t 8,0-8,3 közé.

Maradék etanol az eluálóban.

- A maradék mosópuffer PW van az eluálóban. Az etanol eltávolítható úgy, hogy a centrifugáló oszlopot 3-5 percig centrifugáljuk, majd szobahőmérsékletre vagy 50 ° C-os inkubátorba helyezzük 1-2 percig.

A-1 A minta nem friss. - Vegyen ki pozitív minta DNS -t kontrollként annak megállapítására, hogy a minta DNS -e lebomlott -e.

A-2 Nem megfelelő előkezelés. - A túlzott folyékony nitrogén őrlés, a nedvesség visszanyerése vagy a minta túl nagy mennyisége okozza.

Az előkezeléseknek különböző minták esetén eltérőnek kell lenniük. A növényi mintáknál ügyeljen arra, hogy alaposan őrölje folyékony nitrogénben. Az állati minták esetében homogenizálja vagy alaposan őrölje le folyékony nitrogénben. A nehezen törhető sejtfalú minták, például G+ baktériumok és élesztők esetében lizozim, litikáz vagy mechanikus módszerek használata javasolt a sejtfalak törésére.

4992201/4992202 Növényi genomikus DNS készlet oszlopos módszert alkalmaz, amely kloroformot igényel az extraháláshoz. Különösen alkalmas különféle növényi mintákhoz, valamint növényi száraz porhoz. A Hi-DNAsecure Plant Kit szintén oszlopos, de nem igényel fenol/kloroform extrakciót, így biztonságos és nem mérgező. Alkalmas magas poliszacharid- és polifenol -tartalmú növényekhez. 4992709/4992710 A DNAquick Plant System folyékony alapú módszert alkalmaz. Fenol/kloroform extrakcióra sincs szükség. A tisztítási eljárás egyszerű és gyors, nincs korlátozás a minta kezdeti mennyiségére, így a felhasználók rugalmasan állíthatják be a mennyiséget a kísérleti követelményeknek megfelelően. Nagy méretű gDNS -fragmensek kaphatók nagy hozammal.

A genomiális DNS -t különböző térfogatú emberi teljes vérmintákból extraháltuk a TIANamp Blood DNA Kit segítségével. Az eredmények a következők. Az eredmények csak referenciaként vannak feltüntetve, a tényleges extrakciós eredmények a minták körülményeitől függenek.

A vérrög -DNS -kivonást a két készletben található reagensek segítségével lehet elvégezni, egyszerűen megváltoztatva a protokollt a vérrög -DNS -kivonás specifikus utasításaira. Kérésre a vérrög DNS -kivonási protokoll lágy példánya kiadható.

Szuszpendálja a friss mintát 1 ml PBS -sel, normál sóoldattal vagy TE pufferrel. Teljesen homogenizálja a mintát homogenizátorral, és a csapadékot centrifugálással gyűjtse össze a cső aljára. Dobja ki a felülúszót, és szuszpendálja újra a csapadékot 200 μl GA pufferrel. A következő DNS -tisztítás az utasítás szerint elvégezhető.

A gDNS tisztításához plazma-, szérum- és testfolyadék -mintákban a TIANamp Micro DNS Kit ajánlott. A vírus gDNS szérum/plazma mintákból való tisztításához a TIANamp Virus DNS/RNS Kit ajánlott. A bakteriális gDNS szérum- és plazmamintákból történő tisztításához a TIANamp Bacteria DNS Kit ajánlott (pozitív baktériumok esetén lizozimot kell tartalmazni). A nyálmintákhoz a Hi-Swab DNS Kit és a TIANamp Bacteria DNA Kit ajánlott.

A DNSsecure Plant Kit vagy a DNAquick Plant System ajánlott gombás genom kinyerésére. Az élesztő genom extrakciójához a TIANamp Yeast DNS Kit ajánlott (a litikázt önállóan kell elkészíteni).